Reactivo ELISA para HBcAb
INFORMACIÓN GENERAL
INTRODUCCIÓN
El antígeno central de la hepatitis B (o HBcAg) es el componente principal de las partículas centrales del
virus de la hepatitis B (o VHB). Las partículas tienen un tamaño de 27 nm y contienen una molécula de ADN
de doble cadena circular, una ADN-polimerasa específica y HBeAg; el HBcAg está
compuesto por un único polipéptido de aproximadamente 17 kD que se libera tras la desagregación
de las partículas centrales; el antígeno contiene al menos un determinante
inmunológico. Tras la infección primaria, los anticuerpos anti-HBcAg son uno de los primeros
marcadores de hepatitis por VHB que aparecen en el suero del paciente, junto con el HBsAg o un poco más tarde que el antígeno de superficie viral. Los anticuerpos anti-HBcAg se producen
normalmente en títulos altos y su presencia es detectable incluso años después de la infección. Se han observado anticuerpos anti-HBc aislados, en ausencia de otros marcadores de VHB, en unidades de sangre, lo que sugiere el uso de esta prueba para la detección del VHB, además del HBsAg. La determinación de HBcAb se ha vuelto importante para la clasificación del agente viral,
junto con la detección de otros marcadores de infección por VHB, en suero y plasma.
PRINCIPIO DEL ENSAYO
Este kit ELISA anti-HBc se basa en un principio ELISA competitivo de incubación en fase sólida de un solo paso. El anti-HBc, si está presente en la muestra, compite con el anti-HBc monoclonal conjugado con peroxidasa de rábano picante (HRP) por una cantidad fija de
HBcAg purificado recubierto previamente en los pocillos. Cuando no hay anti-HBc presente en la muestra, el anti-HBc marcado con HRP se unirá a los antígenos dentro de los pocillos y cualquier conjugado de HRP no unido se eliminará durante el lavado. Se añaden soluciones de cromógeno B y A
en los pocillos y durante la incubación los cromógenos incoloros son hidrolizados por el
conjugado HRP unido a un producto de color azul. El color azul se torna amarillo después de
detener la reacción con ácido sulfúrico. La ausencia o poca formación de color sugiere la
presencia de anticuerpos contra HBcAg en la muestra.